PCR技術中為什么3次循環才能得到目的基因?
1、第一個循環擴增出來的新片段很長很長。
2、第二個循環以新的長片段為模板進行,但新片段的一端是引物開頭的,所以第二個循環得到的片段就是我們需要的長度,但只是一條鏈,所以還不能分離出目的基因。
3、第三個循環,當以第二個循環得到的新片段為模板時,因為這個片段的長度就是需要擴增的長度,當第三個循環完成時,這個片段是需要的長度,且是雙鏈DNA,這就得到了需要的目的基因了。
這三個熱反應過程的重復稱為一個循環,經過 20-40 個循環可擴增得到
主要由高溫變性,低溫退火和適溫延伸三個步驟反復的熱循環構成:即在25~30 次循環后,模板dna的含量可以擴大100萬倍以上。
為什么pcr擴增目的基因要到第三輪循環產物中才開始出現兩條脫氧